【技术应用】细胞计数仪真的有那么准吗？一台细胞计数仪要经得起什么考验？
发布时间：
2024-10-22
来源：
牛顿光学
准确性与重复性验证实验
细胞计数仪取代传统计数
01细胞计数发展
在现代生物学研究中，细胞计数是细胞实验室中一项基础且重要的操作。随着科技的不断进步，传统人工技术方法已无法满足科研工作者快速准确计数的需求，正逐渐被细胞计数仪所替代。
细胞计数仪不仅避免了实验人员用眼疲劳和减少人为操作误差的问题，而且可以查看细胞图片和导出实验数据，满足法规要求的数据可追溯性。
面对市面上各式各样的细胞计数仪，怎么评估其性能呢？要回答这个问题，首先需要知道细胞计数仪的性能水平表现在以下几个方面：计数结果的准确性、重复性、仪器操作的便捷性，仪器功能的丰富性，实验数据的可追溯性。其中，准确性和重复性无疑是科研工作者最关心的两个重点，一步错，步步错，数据不准，结果就不准。那么，我们该如何验证一台细胞计数仪的计数结果是否准确呢？
接下来我们在明场模式下，进行细胞计数准确性与重复性的验证实验。
02验证准确性部分
实验目的
通过对已知浓度细胞样品进行梯度稀释获得多个已知浓度细胞样品，使用细胞计数仪测量以上样品，验证该浓度范围内细胞计数仪计数结果的准确性与稀释线性。
实验方案
1.将HEK293细胞收集离心后，使用PBS对细胞进行重悬，利用人工计数测得细胞悬液浓度为86.06×105cells/mL，样品记为Cell-1；
2.将细胞悬液Cell-1分别用PBS进行2倍、4倍、8倍、16倍、稀释，分别得到Cell-2、Cell-3、Cell-4、Cell-5；
3. 分别取Cell-1—5样品，使用细胞计数仪进行测量。
结果展示
实验结论
对比理论浓度与测量浓度显示，在5×105cells/mL-80×105cells/mL细胞浓度范围内，细胞计数仪计数结果准确，稀释线性良好，结果拟合R2值大于0.99。
03验证重复性部分
实验目的
通过对不同浓度的HEK293细胞样品进行多次测量，验证细胞计数仪测试数据的重复性。
实验方案
1. 分别配制高中低三种代表浓度的HEK293细胞，分别得到Cell-1、Cell-2、Cell-3；
2. 将三种浓度的细胞分别用细胞计数仪进行分析，每个样品分析六次，考察样品计数结果的重复性；
3.使用血球计数板进行人工计数，对比仪器分析结果。
结果展示
实验结论
细胞计数仪计数结果与人工计数结果相近，细胞计数仪的结果重复性优秀，CV值可以达到5%以内。
END
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