同样数细胞，为什么每个人数出来的结果都不同？

2022-12-13 17:12:12

牛顿光学

智能成像，一步到位！

Preface

细胞计数是大部分生物人的日常。不论是细胞培养（比如传代，冻存），亦或是准备细胞用于下一步实验（比如转染），数细胞都是一件有些折磨的小事，但也是一件必不可少，非常重要的小事。细胞计数不正确，无法给细胞最优的生长环境，还可能导致加大下游实验的误差。

在对细胞的浓度及活率进行测量时，你是否会遇到同样的状况：明明同一板细胞，为什么每个人测量出来的结果都不一样？为什么我自己数了几次差异都比较大？注意以下几点，能在细胞计数上有很大帮助。

细胞计数前的准备工作

上样的样本室要擦拭干净，或自动计数仪的计数板要保持表面洁净。任何污染都可能导致不准确的结果。对于手动细胞计数，则需要移除和清洁盖玻片，并用70%的乙醇和水清洗计数室。

细胞样品的制备

很多情况下计数结果不稳定，都是由样品的不均匀性造成的。此时可以在加入细胞样品前使用涡旋震荡法或“手指轻弹”的方法摇匀细胞样品，并使用移液枪吹打细胞样品。按照上述方法混合样品后，无论从试管中间还是试管底部得到的细胞浓度都是一致的。
避免细胞碎片、杂质的产生，测量活率时，台盼蓝溶液长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀，这时可在37℃水浴约10分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。

机器参数的设置

无论你使用的牛顿光学Cyto系列自动细胞计数仪，或是其他品牌的自动细胞计数仪，还是显微镜+血球细胞计数仪的手动组合，以下仪器相关设置都是至关重要的：

·一致的照明

·正确的对焦

（错误对焦示范图）

（正确对焦示范图）

对于以上的影响因素，牛顿光学Cyto系列全自动细胞计数仪提供了很大的便利性，配备了自动对焦和自动照明功能，优化每个样品的对焦和照明，清晰圈出成图从而消除了人为引入的可变性，减少对计数结果准确性的影响。同时牛顿光学Cyto系列全自动细胞计数仪可以有效的区分细胞杂质；碎片等干扰，也能对较小的细胞进行精准的计数。