【细胞解读系列】如何将HepG2细胞培养好？

2022-12-02 17:08:19

牛顿光学

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肝脏作为人体五脏之一，与机体正常的代谢、解毒、凝血等过程息息相关，并且参与机体免疫，是维持机体生命不可缺少的重要器官。在进行肝脏疾病的研究中，合适的细胞模型是重要的工具之一，但由于常规肝细胞获取困难、培养难度高、培养成本高昂，在一定程度上制约了肝脏疾病研究的发展。因此，在肝脏研究中选择培养简单、遗传背景稳定的肝细胞系则成为了一种替代选择，其中HepG2是最为常用肝癌细胞系之一。

什么是HepG2细胞

HepG2是来源于一个15岁白人的肝癌组织。该细胞分泌多种血浆蛋白：清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。模式染色体数为55，在免疫抑制小鼠中不致瘤。

（HepG2细胞概述图）

HepG2的细胞特性

1）生长状态：贴壁生长；

2）形态：上皮细胞；

3）该细胞能大容量培养，乙肝表面抗原阴性，对G418 有抗性，对人生长激素有刺激反应。

HepG2细胞的传代小知识

1） 待细胞生长到80%-90%汇合度时，吸弃旧的培养基，加入1ml无菌PBS润洗一次，去除残余的培养基及血清（血清含有胰酶的抑制因子），然后加入1ml 0.25%胰酶，37℃培养箱中消化（1~2min左右，不同细胞消化时间不同），取出细胞，镜下观察细胞至皱缩变圆状态；

2）加入1ml完全培养基（含FBS）终止消化，轻轻拍打，使细胞脱落下来成单个细胞悬液，收集细胞于15ml无菌离心管中，1000rpm，离心5min；

3）收集细胞沉淀，加入完全培养基重悬细胞，一分为二（可根据细胞生长速度调整比例），分别加入到2个新的培养瓶中，做好标记，放入培养箱中培养。

在对细胞进行培养、传代、转染等实验过程中，对细胞的浓度及活率进行分析尤为重要。牛顿光学CytoFlu全自动多通道荧光分析仪将细胞图像分析计数与荧光分析有机结合，既能提供明场细胞计数的统计数据，又可以提供最多13组荧光通道组合的分析结果。优秀的光路系统与图像识别系统，能够有效的区分细胞碎片与杂质的干扰，得到非常稳定可靠的结果。