【细胞解读系列】如何将HepG2细胞培养好?
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肝脏作为人体五脏之一,与机体正常的代谢、解毒、凝血等过程息息相关,并且参与机体免疫,是维持机体生命不可缺少的重要器官。在进行肝脏疾病的研究中,合适的细胞模型是重要的工具之一,但由于常规肝细胞获取困难、培养难度高、培养成本高昂,在一定程度上制约了肝脏疾病研究的发展。因此,在肝脏研究中选择培养简单、遗传背景稳定的肝细胞系则成为了一种替代选择,其中HepG2是最为常用肝癌细胞系之一。
01
什么是HepG2细胞
HepG2是来源于一个15岁白人的肝癌组织。该细胞分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。模式染色体数为55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。


(HepG2细胞概述图)
02
HepG2的细胞特性
1)生长状态:贴壁生长;
2)形态:上皮细胞;
3)该细胞能大容量培养,乙肝表面抗原阴性,对G418 有抗性,对人生长激素有刺激反应。
03
HepG2细胞的传代小知识
1) 待细胞生长到80%-90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至皱缩变圆状态;
2) 加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;
3) 收集细胞沉淀,加入完全培养基重悬细胞,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。
在对细胞进行培养、传代、转染等实验过程中,对细胞的浓度及活率进行分析尤为重要。牛顿光学CytoFlu全自动多通道荧光分析仪将细胞图像分析计数与荧光分析有机结合,既能提供明场细胞计数的统计数据,又可以提供最多13组荧光通道组合的分析结果。优秀的光路系统与图像识别系统,能够有效的区分细胞碎片与杂质的干扰,得到非常稳定可靠的结果。


(HepG2细胞不同浓度在CytoFlu荧光通道下的Merge图像)
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