【细胞解读系列】HEK293细胞系,您了解多少呢?
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近年来,用于重组蛋白药物生产的主要细胞为哺乳动物细胞,因为它们具有类似人类细胞的糖基化修饰方式,HEK293 衍生的细胞系通常用于瞬时蛋白质生产,已成为一种广泛应用于生产重组蛋白的哺乳动物异源表达系统。
01
什么是HEK93
HEK293细胞,又叫人胚胎肾细胞293,是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系,具有转染效率高,易于培养等特点。因此成为了广大研究者研究基因功能的一个强大工具。


(HEK293图册)
02
HEK293细胞系概览
(注:以下细胞介绍中,HEK293细胞简称为293细胞)
293T细胞:293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进蛋白的表达。293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。
293T/17细胞:293T细胞中共转染入pBND 和 pZAP 质粒,获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外,还具有高转染性的特点。
293H细胞:293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。另外,该细胞系贴附力好,而被用于噬菌斑检测等应用。
293E细胞:293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系,该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV复制起点(oriP)的重组表达质粒,能够在H293E细胞中复制,并实现蛋白的高效表达。
293F细胞:293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV- SPORT6-TAg.Neo质粒的转化细胞系,能够快速增殖,易转染,其能够用于慢病毒的生产。
293S细胞:293S细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。
293SGGD细胞:293SGGD细胞系则指的是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系,其主要用于糖基化工程研究中。

(HEK293概述图)
03
HEK293细胞表达系统的优势
1) 转染效率高;
2) 2) 可悬浮培养用于大规模表达;
3) 表达蛋白结构最接近其在人体内构象;
4) HEK293细胞在培养体系中能够快速增长,高密度培养。
5) HEK293细胞与神经元细胞一样,对外界微环境较为敏感,利用这一特点,可用于药物发现及细胞毒性测试。
在HKE293细胞系培养的整个过程中,都需要对细胞进行浓度和活率检测,牛顿光学CytoCubeAuto全自动便携高通量细胞计数仪是一款基于图像法检测的细胞计数仪,具有优秀的光路系统和图像识别系统,能够有效的区分细胞碎片与杂质的干扰,得到非常稳定可靠的结果。


(CutoCubeAuto明场与台盼蓝对HEK293细胞圈出情况)
参考文献:Lin Y C, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.
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